Equipements & Technologies
Equipements & Technologies
Liste des Équipements & Technologies de la plateforme MGC
Accueil / Equipement & Technologies / Clonage
Clonage
Les clones issus des ORFeomes sont reséquencés aux extrémités et vérifiés par digestion. Selon leur taille, ils ne sont pas nécessairement re-séquencés entièrement.
Documentation fournie avec les clones
- Séquence théorique de l’ORF
- Séquence expérimentale obtenue
- Alignement des deux séquences
- Séquence de l’ORF intégrée dans le pDON
Stockage et Livraison
Les clones sont :
- Livrés sous forme de miniprep
- Archivés dans nos congélateurs
Importance de l’Isoforme
Il est fondamental de bien vérifier l’isoforme présent dans l’ORFeome avant toute utilisation.
Création de Vecteurs d’Entrée
Lorsque l’ORF d’intérêt n’est pas présent dans nos banques, il est possible de :
- Créer un vecteur d’entrée (pDON221 Gateway)
- Utiliser une PCR de la séquence désirée
Contrôle Qualité
Les clones issus de BP sont :
- Séquencés entièrement
- Livrés sous forme de miniprep
Documentation fournie
- Séquences expérimentales
- Alignement avec la séquence théorique
Vecteurs d’Expression Disponibles
La banque MGC propose des vecteurs d’expression eucaryote et procaryote :
- Compatibles avec le système de clonage Gateway
- Permettant des fusions avec différents tags en C ou N terminal
- Offrant un contrôle via des promoteurs plus ou moins forts
Processus de Clonage
La réaction LR permet de :
- Cloner les ORF dans n’importe quels vecteurs d’expression
Contrôle Qualité
Les clones issus de réactions LR sont :
- Vérifiés par digestion uniquement
- La séquence des vecteurs de destination est disponible sur demande
BP LR
Contactez-nous
Si vous souhaitez des informations complémentaires, merci de nous contacter.
